这几天中共对一篇NATURE即将发表的所谓多功能干细胞的研究发出了令人震惊的吹捧，究其原因，不外乎这篇文章的第一作者是一个来自中共的在俺们美国拿了PHD的现在正在在做RESEARCH ASSOCIATE的已经把I485递上去的俺的北大的校友同学。

其实这个THOMPSON实验室的工作和同样工作的日本实验室的文章从水平上我看了一眼或许还凑合，和大叔我的那些内车和散思的文章或许能并驾崎岖，但中共的这种莫名其妙的性粪却真的令人发指。你们性愤什么阿？难道真如茶馆的某个中共TB说的：职业，你丫撞死吧，牛拜耳被来自我们中共的年轻的XXX获得了，嘿嘿。中共这种无知简直和他们最近的假老虎和伪长鹅有一拼。首先，那个来自中共的小同学或许仍然持中共护照，但已经基本心归我们美国了；其次，该同学虽然号称是她自己做的，但IDEA和FUNDING都是俺们THOMPSON同学的，所以，和你们中共有关系么？再次，这种工作本身上看起来有些巧妙的地方，但实际根本没有任何的突破，并非那些不懂行的中共同学们说的：什么人类干细胞研究方面抛弃伦理学的一大里程碑，嘿嘿，可能么？

下面我就从我们专业的角度仔细的分析一下这项研究的局限性和贡献，我也不管丫敦子懂还是不懂了，反正这里总有能稍微懂一点的人民，嘿嘿。

首先，从技术的角度，该研究毫无新意。为什么这么说内？首先，RETROVIRAL这种逆转录媚表达特定基因的技术目前在俺们美国就跟测定个蛋白一样普遍，比如俺，就成功的把大约10几个基因同时转入了ENDOTELIA细胞。下面是一个比较典型的我-职业实验室的两个基因同时转染OVEREXPRESSION的PROTOCOL：
CLONE CDNA of target genes

insert in to retroviral construct with HA-tag or GFP or VFG with puromycin resistant

bactrial tranfection to avaiable palsmid to Phenix cells

transfection Phenix cells by lipofectin and obtained supernantant medium containing the virus

put the virus has the Gene A-HA tag construct put on the cells, like ECs;

72 hr, then put puromycin to select cells, normally 5-20% cells in resistant to puromycin,a nd make a stable transfection of cell lines has gene-A-HA tag expression, confirm the gene expression with antibodies to gene-A products and HA tag;

then transfection gene-B-GFP with the same protocol, since this cells with gene-A expression has obtained puromycin-resistant, you can increase the amout the purymycin to selection and to avoid those cells lost resistant, then obtained 90% cells with presumed stable expression of both A and B genes, but most of them acutuall only has A. so you have to use FACS to sorting the cells at single cell clone level or a mixture of cells by it GFP in living cells, those higher fluorescence with GFP is the cell you want has both A and B gene overexpressions. and confirmed by antibodies to A, B, GFP, and HA tag.

and normally you need vector controls, and toatlly 9 stable cell lines and two monthes.

大家也许看不懂，但没有关系。除了基因，细菌智力和病毒图普这些专业BACKGROUND外，其它的和幼儿园水平接近，嘿嘿。因此我们不难看出，THOMPSON和日本同学玩的4个基因同时表达不过是俺上面刻熳龅?个基因表达的重复进行，不过是增加了两步：
1) VFG FUSION 的C-基因CONSTRUCT；这样可以用VFP与GFP不同的波长进行第2次的 FACS上的CELL SORTING， 获得A/B/C 表达细胞；

2)最后D基因的细胞只好用单个细胞克隆或者SORTING的办法了，但也属于比较慢，但A/B/C/D最后都阳性的机率在5-10%左右的高机率事件了。

所以，我们不难看出，从技术学角度，这项研究并非什么突破，最多是比较巧妙了。

其次，我们看其本质的科学贡献，也就是说：基因对人类细胞分化的贡献。人类近30年通过对基因研究的发现早就明白很多基因是控制细胞生长，分化的重要关键因素，癌症其实就是低分化不死性的细胞。肿瘤的化学治疗里面就有一种叫做分化诱导治疗，比如使用胡萝卜素也就是VA或者叫做全反式维甲酸治疗，甚至大家最后找到了RA特异的受体。又比如以前叫的ONCOGENE至癌基因比如C-MYC，N-RAS等其实就是人类生命和细胞早期发育需要表达的重要基因，甚至在成年后一些细胞，比如肝脏再生的时候，这些基因可以迅速的再次被打开表达，但呈现严格的时间程序化和关闭程序化，比如FOS-MYC-RAS基因的表达峰在肝脏PH后3-12-和24个小时，并且前后承接。大家知道人类的肝脏被切1/2后多少时间可以回到原重？2周时间。但是，癌症就属于上面基因胡乱表达并不被关闭的样子了。最近对ANGIOGENESIS和其它的组织早期分化的研究证明了一些其它的非ONCOGENE但叫做分化基因的作用，就比如THOMPSON和日光小组共同使用的那两个基因。

但是我们不难看出，就是研究的这么细致了，人类对于到底是那个基因在什么时候什么细胞里面对什么分化什么不死什么增殖却仍然是两眼盲盲，我曾经发表了我总结的6种人类正在使用的对白血病分化的化学药品对这些相关基因的影响，结果只是稍微的有些规律，比如向粒细胞分化而不向单核细胞分化的原因。所以，很早就有人民把C-MYC或者N-RAS表达进那些接近正常和非正常之间的比如老鼠的3T3成纤维细胞进行肿瘤诱导了。记得我当年用；至癌剂+老鼠2/3肝切除做化学至癌的情景了，很苦阿，嘿嘿。

因此，我们不难看出，THOMPSON等同学的研究不过是证明了几个关键以致作用的基因，在逆转人类细胞分化中的作用。且不说这些细胞是不是真的组织特异性SIDE细胞。或者真的多功能可分化细胞--干细胞，就单说他们使用的不同鸡尾酒配方获得的类似结果就可以推断--他们使用的办法是非特异性的，可以被别的基因取代的。

就此而言，他们确实没有什么可吹嘘的本钱。而中共外行人民吹嘘这个，就更令人一笑大方了，嘿嘿。

但是，我想，他们的工作也是有些贡献的。
1)首先，由于人类细胞很难培养传代，所以正如小汤说的那样：这些改造过的正常具有多分化潜能的细胞，可以被大家使用来进行培养和相关的的研究：细胞系比较容易建立维持；
2)其次，首先证明了有些基因可以只逆转分化，并维持多功能分化潜能而与癌症没有直接的关系。同时证明了，可能有次序的人为控制的表达和关闭一些基因，可以达到逆分化的基因治疗衰老和疾病损失再生的目的。而以前的主要方向是对基因调控部件的了解，现在转移到稳定蛋白产物的了解了--虽然这些蛋白其实大部分仍然是细胞核里面的调控基因蛋白，但毕竟更清晰了，而不是简单的点突变或者GENE WALK的改变OFR上游或者下游POMOTER和其它反式作用原件了。

但是，因为按照俺的经验来看：细胞是不喜欢任何外来基因的高表达的，特别是肿瘤细胞甚至不喜欢好基因的表达，这些被OVEREXPRESSION的外来基因在3-6个月内都会逐渐的被KICK-OUT或者MODIFICATION。另外这些逆转录病毒插入GENOMIC的不确定性完全降低了他们真正的临床使用的伦理学价值。

不过中共目前是不在乎这点的，他们肯定会疯狂的复制上面的研究过程，跟张一毛跟屁股李安一样，因为，他们没有任何伦理学方面的顾忌。

他们连上帝都不CARE，他们CARE个鸟伦理学阿，嘿嘿。

就谈到这里吧。