| 從剛才的EIA測定看這次長鵝的失敗(嘿嘿創) |
| 送交者: 職業 2007年12月14日10:09:10 於 [史地人物] 發送悄悄話 |
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EIA是什麼東東內?以前這個技術叫做RIA,需要I125。記得當時大叔我剛來美國的時候和德國鬼子湯普森就在他的辦公室裡面一面嚼着他辦公桌上大管子裡面的帶驗粒兒的硬棒子,一邊用HPLC分離着標記了I125的RIA用的抗體。那叫一個爽,周末都來,還有KATHY WU,她是負責製備馬血清的。 但畢竟比較麻煩,現在我只買CAYMAN的EIA了,雖然貴點,250刀一個96空板,但比較簡單的姚明,學生們比較喜歡做。反正也是系裡面的教學經費,嘿嘿,不花白不花,花了也白花,反正是百花。 咸話少說,鹽貴正賺。 做EIA有個關鍵步驟,就是要預先估計稀釋度。這個是稍微比RIA複雜的。RIA雖然本身複雜一些,但因為抗體標記的是小分子同位素,這樣抗體的親和力就比較高,可測定的樣品濃度就比較大,標準曲線就可以範圍廣大約是1000多倍吧,也就是說:樣品可以基本不用預先知道範圍的粗測,而可以直接搞定--因為無論高低,除非特殊,基本都能被CATCH住,在S型競爭標準曲線內,經過反對數換算很容易得到準確直。 但EIA就不同樂,因為抗體結合的是煤,親和力迅速的下降,而且因為有些樣品因為濃度低需要先乙仙化,這樣測定的範圍就更小了,只有30-100倍之間,也就是系列背比稀釋的標準曲線不是10-3-1系列,而是弱小的1/2系列。這樣就導致了不同樣品間只要濃度改變超過了10倍以上或者是未知樣品都需要測定一個:預先稀釋度。就是使用少量樣品,降低N直,先估計好範圍,粗整一下,有時要測2-4個不同稀釋度。然後最後在整真測定。 這基本是我這門課要教會學生的東東。 剛才幫助學生們測定好了,發現有的估計還是不准,就教他們今天繼續估計,明天拿結果。這EIA一般要2天時間。 我由此就想到了,什麼是科學內?科學其實就是糾正錯誤,尋找最佳條件的過程。發現錯誤,共同討論糾正分析TROUBLE SHOOTING,正是我們這些科學家的工作之一。 可讓中共的長鵝同學們明白這點砸那麼難內?而且他們居然敢無恥的為兩張地面的照片和PS他人的照片開全國9個中共常委的大會--到底是黨搞科研阿?還是政府搞科研? 我想,除了瘋子以外, 世界上只有傻-叉-和騙子估計不承認自己有錯誤,原因麼,因為他們自己就是錯誤本身。
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