| 从刚才的EIA测定看这次长鹅的失败(嘿嘿创) |
| 送交者: 职业 2007年12月14日10:09:10 于 [史地人物] 发送悄悄话 |
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EIA是什么东东内?以前这个技术叫做RIA,需要I125。记得当时大叔我刚来美国的时候和德国鬼子汤普森就在他的办公室里面一面嚼着他办公桌上大管子里面的带验粒儿的硬棒子,一边用HPLC分离着标记了I125的RIA用的抗体。那叫一个爽,周末都来,还有KATHY WU,她是负责制备马血清的。 但毕竟比较麻烦,现在我只买CAYMAN的EIA了,虽然贵点,250刀一个96空板,但比较简单的姚明,学生们比较喜欢做。反正也是系里面的教学经费,嘿嘿,不花白不花,花了也白花,反正是百花。 咸话少说,盐贵正赚。 做EIA有个关键步骤,就是要预先估计稀释度。这个是稍微比RIA复杂的。RIA虽然本身复杂一些,但因为抗体标记的是小分子同位素,这样抗体的亲和力就比较高,可测定的样品浓度就比较大,标准曲线就可以范围广大约是1000多倍吧,也就是说:样品可以基本不用预先知道范围的粗测,而可以直接搞定--因为无论高低,除非特殊,基本都能被CATCH住,在S型竞争标准曲线内,经过反对数换算很容易得到准确直。 但EIA就不同乐,因为抗体结合的是煤,亲和力迅速的下降,而且因为有些样品因为浓度低需要先乙仙化,这样测定的范围就更小了,只有30-100倍之间,也就是系列背比稀释的标准曲线不是10-3-1系列,而是弱小的1/2系列。这样就导致了不同样品间只要浓度改变超过了10倍以上或者是未知样品都需要测定一个:预先稀释度。就是使用少量样品,降低N直,先估计好范围,粗整一下,有时要测2-4个不同稀释度。然后最后在整真测定。 这基本是我这门课要教会学生的东东。 刚才帮助学生们测定好了,发现有的估计还是不准,就教他们今天继续估计,明天拿结果。这EIA一般要2天时间。 我由此就想到了,什么是科学内?科学其实就是纠正错误,寻找最佳条件的过程。发现错误,共同讨论纠正分析TROUBLE SHOOTING,正是我们这些科学家的工作之一。 可让中共的长鹅同学们明白这点砸那么难内?而且他们居然敢无耻的为两张地面的照片和PS他人的照片开全国9个中共常委的大会--到底是党搞科研阿?还是政府搞科研? 我想,除了疯子以外, 世界上只有傻-叉-和骗子估计不承认自己有错误,原因么,因为他们自己就是错误本身。
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